CLARITY 組織透明化技術

l  什麼是CLARITY

CLARITY 組織透明化技術，保留完整的組織結構、細胞形態以及重要的訊息分子，例如蛋白質、核酸等，讓組織變成透明。透過這樣的處理，我們有機會在大範圍的組織中，進行細微結構的探索，重要的是跳過傳統組織技術切片的過程，組織的完整可以更忠實的呈現。

l  為什麼不透明？

光線經過不同的介質，因為折係數的差異，會改變光線行進的方向，水杯中的筷子產生轉折的影像就是一個例子。生物細胞有富含脂肪分子的細胞膜包覆，胞內、胞外有著成分不同的液體分布，光線穿入組織時，就不斷的在這些不同的介質間轉折，於是無法穿過，所以不透明。把脂肪分子移除，可以有效改變光線的折射，讓組織變成透明。

l    如何透明？

CLARITY 主要的處理流程有三個步驟：

1.      組織用混和 arymlamine 和 paraformaldehyde 的hydrogel 固定，將溫度由4C 提升到37C 的過程聚合，形成網狀結構，將組織固定

2.      組織放在循環的SDS 容易中，利用電泳形成的驅力，讓 SDS穿透過組織，將脂肪分子帶走

3.      最後將 SDS洗清後，可以用免疫組織化學的方式，將我們有興趣的分子，標定螢光訊號。若是樣本本身就帶有內生的螢光訊號，則讓整個組織標本呈現的資訊內容更為豐富。經過特定澄清液（FocusClear, RapiClear …）的調整，組織可以達到最佳程度的透明。可以肉眼直視，一目了然。

l   在 Confocol microscope 的系統中，我們可以大範圍掃描擷取3D 結構中的細節，從不同的角度或不同深度觀察。展示的相片拍攝位置：中樞的大腦皮層（圖A）、海馬迴（圖B）、周邊的背根神經節（圖C）、舌頭中的肌肉與血管（圖D）、大腦皮層中的錐狀細胞（圖E）、齒狀回（圖F）。